微生物技术资料
文章检索
  首页 > 微生物知识->中国药典微生物检测->非无菌产品微生物限度检查控制菌检查法-2015中国药典

非无菌产品微生物限度检查控制菌检查法-2015中国药典


录入时间:2014-9-16 10:36:38 来源国家药典委员会

控制菌检查法系用于在规定的试验条件下检查供试品中是否存在特定的微生物

当本法用于检查非无菌制剂及其原辅料是否符合相应的微生物限度标准时应按下列规定进行检验包括样品取样量和结果判?#31995;取?

本检查法可采用替代的微生物检查法包括自动检测方法但必须证明替代方法等效于药典规定的检查方法

供试液制备及实验环境要求同非无菌产品微生物限度检查微生物计数法?#20445;?#36890;则1105

如果供试品具有抗菌活性应尽可能去除或中和供试品检查时, 若使用了中?#22270;?#25110;灭活剂应确认?#34892;?#24615;及对微生物无毒性

供试液制备时如果使用了表面活性剂应确认其对微生物无毒性以及与所使用中?#22270;?#25110;灭活剂的相容性

培养基适用性检查和控制菌检查方法适用性试验

供试品控制菌检查中所使用的培养基应进行适用性检查

供试品的控制菌检查方法应进行方法适用性试验以确认所采用的方法适合于该产品的控制菌检查

若检验程序或产品发生变化可能影响检验结果时控制菌检查方法应重新进行适用性试验

菌种及菌液制备

菌种 试验用菌株的传代?#38382;?#19981;得超过5 代从菌种保藏中心获得的干燥菌种为第0 代并采用?#23460;?#30340;菌种保藏技术进行保存?#21592;?#35777;试验菌株的生物学特性

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)CMCCB26 003

铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)CMCCB10 104

大肠埃希菌(Escherichia coli)CMCCB44 102

乙型副伤寒沙门菌(Salmonella paratyphi B)CMCCB50 094

白色念珠菌(Candida albicans)CMCCF98 001

生孢梭菌Clostridium sporogenesCMCCB64 941

菌液制备 将金黄色葡萄球菌铜绿假单胞菌大肠埃希菌沙门菌分别接种于胰酪大豆胨液体培养基中或在胰酪大豆胨琼脂培养基上3035培养1824 小时将白色念珠菌接种于沙氏葡萄糖琼脂培养基上或沙氏葡萄糖液体培养基中2025培养23 天将生孢梭菌接种于梭菌增菌培养基中置厌氧条件下3035培养2448 小时或接种于硫乙醇酸盐流体培养基中3035培养1824 小时上述培养物用pH7.0 无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%无菌氯化钠溶液制成?#23460;?#27987;度的菌悬液

菌液制备后若在室温下放置应在2 小时内使用若保存在28棬可在24 小时内使用生孢梭菌孢?#26377;?#28082;?#21830;?#20195;新鲜的菌悬?#28023;?#31283;定的孢?#26377;?#28082;可保存在28棬在验证过的贮存期内使用

阴性对照

为确认试验条件是否符合要求应进行阴性对照试验 阴性对照试验应无菌生长如阴性对照有菌生长应进行偏差调查

培养基适用性检查

控制菌检查用的成品培养基由脱水培养基或按处方配制的培养基均应进行培养基的适用性检查

控制菌检查用培养基的适用性检查项目包括促生长能力抑制能力及指示特性的检查各培养基的检测项目及所用的菌株见表1

表1 控制菌检查用培养基的促生长能力抑制能力和指示特性

 

液体培养基促生长能力检查 分别接?#26893;?#22823;于100cfu 的试验菌见表1于被检培养基和对照培养基中在相应控制菌检查规定的培养温度及不长于规定的最短培养时间下培养与对照培养基管比?#24076;?#34987;检培养基管试验菌应生长良好

固体培养基促生长能力检查 用涂布法分别接?#26893;?#22823;于100cfu 的试验菌见表1于被检培养基和对照培养基平板上在相应控制菌检查规定的培养温度及不长于规定的最短培养时间下培养被检培养基与对照培养基上生长的菌落大小形态特征应一致

培养基抑制能力检查 接?#26893;?#23569;于100cfu 的试验菌见表1于被检培养基和对照培养基中在相应控制菌检查规定的培养温度及?#27426;?#20110;规定的最长培养时间下培养试验菌应不得生长

培养基指示特性检查 用涂布法分别接?#26893;?#22823;于100cfu 的试验菌见表1于被检培养基和对照培养基平板上在相应控制菌检查规定的培养温度及不长于规定的最短培养时间下培养被检培养基上试验菌生长的菌落大小形态特征指示剂反应情况等应与对照培养基一致

控制菌检查方法适用性试验

供试液制备 按下列供试品检查中的规定制备供试液

试验菌 根据各品种项下微生物限度标准中规定检查的控制菌选择相应试验菌株确认耐胆盐革?#23478;?#24615;菌检查方法时,采用大肠埃希菌和铜绿假单胞菌为试验菌

适用性试验 按控制菌检查法取规定量供试液及不大于100cfu 的试验菌接入规定的培养基中采用薄膜过滤法时,取规定量供试液,过滤,冲洗,试验菌应加在最后一次冲洗液中,过滤后,注入规定的培养基或取出滤膜接入规定的培养基中依相应的控制菌检查方法在规定的温度及最短时间下培养应能检出所加试验菌相应的反应特征

结果判断 上述试验若检出试验菌按此供试液制备法和控制菌检查方法进行供试品检查若未检出试验菌应消除供试品的抑菌活性见非无菌产品微生物检查微生物计数法附录中的抗菌活性的去除或灭活?#20445;?#24182;重新进行方法适用性试验

如果经过试验?#20998;?#20379;试品对试验菌的抗菌作用无法消除可认为受抑制的微生物不可能存在于该供试品中选择抑菌成份消除相对彻底的方法进行供试品的检查

供试品检查

供试品的控制菌检查应按经方法适用性试验确认的方法进行

阳性对照试验 阳性对照试验方法同供试品的控制菌检查,对照菌的加量应不大于100cfu阳性对照试验应检出相应的控制菌

阴性对照试验 以稀?#22270;链?#26367;供试液照相应控制菌检查法检查阴性对照试验应无菌生长如果阴性对照有菌生长应进行偏差调查

耐胆盐革?#23478;?#24615;菌(Bile-Tolerant Gram-Negative Bacteria)

供试液制备和预培养 取供试品用胰酪大豆胨液体作为稀?#22270;?#29031;非无菌产品微生物限度检查微生物计数法 通则1105制成110 供试?#28023;?#28151;匀在2025培养培养时间应使供试品中的细菌充分恢复但不增?#24120;?#32422;2 小时

未检出试验

除另有规定外取相当于1g 或1mL 供试品的上述预培养物接种至肠道菌增菌液体培养基中3035培养2448 小时后划线接种于紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基平板上3035培养1824 小时如果平板上无菌落生长判供试品未检出耐胆盐革?#23478;?#24615;菌

定量试验

选择和分离培养 取相当于0.1g0.01g 和0.001g或0.1mL0.01mL 和0.001mL供试品的预培养物或其稀释液分别接种至肠道菌增菌液体培养基中3035培养2448 小时上述每一培养物分别划线接种于紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基平板上3035培养1824 小时

结果判断 若紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基平板上有菌落生长则对应培养管为阳性否则为阴性根据各培养管检查结果从表2 查对1g 或1ml 供试品中含?#24515;?#32966;盐革?#23478;?#24615;菌的最大可能数

表2 耐胆盐革?#23478;?#24615;菌的可能菌数

注 代表紫红胆盐葡萄糖琼脂平板上有菌落生长代表紫红胆盐葡萄糖琼脂平板上无菌落生长

若供试品量减少10 倍如0.01g 或0.01ml0.001g 或0.001ml0.0001g 或0.0001ml则每1g(或1mL)供试品中可能的菌数N应相应增加10 倍

大肠埃希菌(Escherichia coli)

供试液制备和增菌培养 取供试品照非无菌产品微生物限度检查微生物计数法 通则1105制成110 供试液取相当于1g 或1mL 供试品的供试?#28023;?#25509;种至?#23460;?#20307;积经方法适用性试验确定的的胰酪大豆胨液体培养基中混匀3035培养1824 小时

选择和分离培养 取上述预培养物1mL 接种至100mL 麦康凯液体培养基中4244培养2448 小时取麦康凯液体培养物划线接种于麦康凯琼脂培养基平板上3035培养1872 小时

结果判断 若麦康凯琼脂培养基平板上有菌落生长应进行分离纯化及?#23460;?#30340;鉴定试验, ?#20998;?#26159;否为大肠埃希菌若麦康凯琼脂培养基平板上没有菌落生长或虽有菌落生长但鉴定结果为阴性判供试品未检出大肠埃希菌

沙门菌Salmonella

供试液制备和增菌培养 取10g 或10mL 供试品直接或处理后接种至?#23460;?#20307;积经方法适用性试验确定的的胰酪大豆胨液体培养基中混匀3035培养1824 小时

选择和分离培养 取上述预培养物0.1mL 接种至10mL RV 沙门增菌液体培养基中3035培养1824 小时取少量RV 沙门菌增菌液体培养物划线接种于木糖?#34507;?#37240;脱氧胆酸盐琼脂培养基平板上3035培养1848 小时

沙门菌在木糖?#34507;?#37240;脱氧胆酸盐琼脂培养基平板上生长良好菌落为淡红色或无色透明或半透明中心有或无黑色用接种针挑选?#20260;?#33740;落于三糖铁琼脂培养基高层斜面上进行斜面和高层穿刺接种培养1824 小时或采用其它?#23460;?#26041;法进一步鉴定

结果判断 若木糖?#34507;?#37240;脱氧胆酸盐琼脂培养基平板上有?#20260;?#33740;落生长且三糖铁琼脂培养基的斜面为红色底层为黄色或斜面黄色底层黄色或黑色应进一步进行?#23460;?#30340;鉴定试验, ?#20998;?#26159;否为沙门菌如果平板上没有菌落生长或虽有菌落生长但鉴定结果为阴性或三糖铁琼脂培养基的斜面未见红色底层未见黄色或斜面黄色底层未见黄色黑色判供试品未检出沙门菌

铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa

供试液制备和增菌培养 取供试品照非无菌产品微生物限度检查微生物计数法 通则1105制成110 供试液取相当于1g 或1mL 供试品的供试?#28023;?#25509;种至?#23460;?#20307;积经方法适用性试验确定的的胰酪大豆胨液体培养基中混?#21462;?035培养1824 小时

选择和分离培养 取上述预培养物划线接种于溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基平板上3035培养1872 小时

取上述平板上生长的菌落进行氧化酶试验或采用其它?#23460;?#26041;法进一步鉴定

氧化酶试验 将洁净滤纸片置于平皿内,用无菌玻棒取上述平板上生长的菌落涂于滤纸片上滴加新配制的1二盐酸二甲基?#21592;?#20108;胺试?#28023;?#22312;30 秒内若培养物呈粉红色并逐渐变为紫红色为氧化酶试验阳性,否则为阴性

结果判断 若溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基平板上有菌落生长且氧化酶试验阳性应进一步进行?#23460;?#30340;鉴定试验, ?#20998;?#26159;否为铜绿假单胞菌如果平板上没有菌落生长或虽有菌落生长但鉴定结果为阴性或氧化酶试验阴性判供试品未检出铜绿假单胞菌

金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus

供试液制备和增菌培养 取供试品照非无菌产品微生物限度检查微生物计数法 通则1105制成110 供试液取相当于1g 或1mL 供试品的供试?#28023;?#25509;种至?#23460;?#20307;积经方法适用性试验确定的的胰酪大豆胨液体培养基中混?#21462;?035培养1824 小时

选择和分离培养 取上述预培养物划线接种于甘露醇氯化钠琼脂培养基平板上3035培养1872 小时

结果判断 若甘露醇氯化钠琼脂培养基平板上有黄色菌落或外周有黄色环的白色菌落生长应进行分离纯化及?#23460;?#30340;鉴定试验, ?#20998;?#26159;否为金黄色葡萄球菌若平板上没有与上述形态特征相符或?#20260;?#30340;菌落生长或虽有相符或?#20260;?#30340;菌落生长但鉴定结果为阴性判供试品未检出金黄色葡萄球菌

梭菌Clostridia

供试液制备和热处理 取供试品照非无菌产品微生物限度检查微生物计数法 通则1105制成110 供试液取相当于1g 或1mL 供试品的供试液2 份其中1 份置80保温10 ?#31181;?#21518;迅速冷却

选择和分离培养 将上述2 份供试液分别接种至?#23460;?#20307;积经方法适用性试验确定的的梭菌增菌培养基中置厌氧条件下3035培养48 小时取上述每一培养物少量分别涂抹接种于哥伦比亚琼脂培养基平板上置厌氧条件下3035培养4872 小时

过氧化氢酶试验 取上述平板上生长的菌落置洁净玻片上滴加3%过氧化氢试?#28023;?#33509;菌落表面有气泡产生,为过氧化氢酶试验阳性,否则为阴性

结果判断 若哥伦比亚琼脂培养基平板上有带或不带芽孢的厌氧杆菌生长且过氧化氢酶反应阴性的应进一步进行?#23460;?#30340;鉴定试验, ?#20998;?#26159;否为梭菌如果哥伦比亚琼脂培养基平板上没有厌氧杆菌生长或虽有相符或?#20260;?#30340;菌落生长但鉴定结果为阴性或过氧化氢酶反应阳性判供试品未检出梭菌

白色念珠菌Candida albicans

供试液制备和增菌培养 取供试品照非无菌产品微生物限度检查微生物计数法 通则1105制成110 供试液取相当于1g 或1mL 供试品的供试?#28023;?#25509;种到100mL 沙氏葡萄糖液体培养基中混匀3035培养35 天

选择和分离 取上述预培养物划线接种于沙氏葡萄糖琼脂培养基平板上3035培养2448 小时

白色念珠菌在沙氏葡萄糖琼脂培养基上生长的菌落呈乳白色?#25216;?#28129;黄色,表面光滑有浓酵母气味,培养时间稍久则菌落增大颜色变深质地变硬或有皱褶挑取?#20260;?#33740;落接种至念珠菌显色培养基平板上培养2448 小时必要时延长至72 小时或采用其它?#23460;?#26041;法进一步鉴定

结果判断 若沙氏葡萄糖琼脂培养基平板上有?#20260;?#33740;落生长?#20057;伤?#33740;在念珠菌显色培养基平板上生长的菌落阳性反应应进一步进行?#23460;?#30340;鉴定试验, ?#20998;?#26159;否为白色念珠菌若沙氏葡萄糖琼脂培养基平板上没有菌落生长或虽有菌落生长但鉴定结果为阴性或?#20260;?#33740;在念珠菌显色培养基平板上生长的菌落?#23460;?#24615;反应判供试品未检出白色念珠菌

稀释液

稀释液配制后,应采用验证?#32454;?#30340;灭菌程序灭菌

1. pH7.0 无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液 照无菌检查法通则1101)制备

2. pH6.8 无菌磷酸盐缓冲液pH7.2 无菌磷酸盐缓冲液 pH7.6 无菌磷酸盐缓冲液按缓冲液 照缓冲?#28023;?#36890;则8004配制后,过滤,分装,灭菌

如需要,可在上述稀释?#22909;?#33740;前或灭菌后加入表面活性剂或中?#22270;取?

3. 0.9%无菌氯化钠溶液 取氯化钠9.0g,加水溶解使成1000ml过滤分?#22467;?#28781;菌

培养基及其制备方法

培养基可按以下处方制备,也可使用按?#20040;?#26041;生产的符合要求的脱水培养基配制后,应按验证过的高压灭菌程序灭菌

1.胰酪大豆胨液体培养基TSB胰酪大豆胨琼脂培养基(TSA)沙氏葡萄糖液体培养基(SDB) 照无菌检查法通则1101)制备

2沙氏葡萄糖琼脂培养基(SDA)

照无菌检查法通则1101)制备如使用含抗生素的沙氏葡萄糖琼脂培养基应确认培养基中所加的抗生素量不影响检品中霉菌和酵母菌的生长

3 马铃薯葡萄糖琼脂培养基PDA

马铃薯(去皮) 200g           琼脂 14.0g

葡萄糖 20.0g                  纯化水 1000mL

取马铃薯切成小块加水1000mL煮沸20-30min用6-8 层?#24202;?#36807;滤取滤液补水至1000ml调节pH 值使灭菌后在25的pH 值为5.60.2加入琼脂,加热溶化后, 再加入葡萄糖摇匀分?#22467;?#28781;菌

4.玫瑰红钠琼脂培养基培养基

胨 5.0g             玫瑰红钠 0.0133g

葡萄糖 10.0g     琼脂 14.0g

磷酸二氢钾 1.0g 纯化水 1000ml

硫酸镁 0.5g

除葡萄糖玫瑰红钠外,取上述成分,混合,微温溶解加入葡萄糖玫瑰红钠,摇匀分?#22467;?#28781;菌

5硫乙醇酸盐流体培养基 照无菌检查法通则1101制备

6肠道菌增菌液体培养基

明胶胰酶水解物 10.0g      二水合磷酸氢二钠 8.0g

牛胆盐 20.0g                  亮绿 15mg

葡萄糖 5.0g                    纯化水 1000mL

磷酸二氢钾 2.0g

除葡萄糖亮绿外,取上述成分,混合,微温溶解调节pH 值使加?#32676;?#22312;25的pH 值为7.20.2加入葡萄糖亮绿加热至100 30 ?#31181;?#31435;即冷却

7紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基

酵母浸出粉 3.0g         中性红 30mg

明胶胰酶水解物 7.0g   结晶紫 2mg

脱氧胆酸钠 1.5g         琼脂 15.0g

葡萄糖 10.0g             纯化水 1000mL

氯化钠 5.0g

除葡萄糖中性红结晶紫琼脂外,取上述成分,混合,微温溶解调节pH使加?#32676;?#22312;25的pH 值为7.40.2加入葡萄糖中性红结晶紫琼脂加热煮沸不能在高压灭菌器中加热

8麦康凯液体培养基

明胶胰酶水解物 20.0g      溴甲酚紫 10mg

乳糖 10.0g                     纯化水 1000mL

牛胆盐 5.0g

除乳糖溴甲酚紫外取上述成分混合微温溶解调节pH 值使灭菌后在25的pH 值为7.30.2加入乳糖溴甲酚紫分?#22467;?#28781;菌

9麦康凯琼脂培养基

明胶胰酶水解物 17.0g        中性红 30.0mg

胨肉或?#19994;?#30333; 3.0g       结晶紫 1mg

乳糖 10.0g                       琼脂 13.5g

脱氧胆酸钠 1.5g                纯化水 1000mL

氯化钠 5.0g

除乳糖中性红结晶紫琼脂外取上述成分混合微温溶解调节pH值使灭菌后在25的pH 值为7.10.2加入乳糖中性红结晶紫琼脂加热煮沸1 ?#31181;?#24182;?#27426;?#25391;摇分?#22467;?#28781;菌

10RV 沙门菌增菌液体培养基

大豆胨 4.5g            六水?#19979;?#21270;镁 29.0g

氯化钠 8.0g            孔雀绿 36mg

磷酸氢二钾 0.4g      纯化水 1000mL

磷酸二氢钾 0.6g

除孔雀绿外取上述成分混合微温溶解调节pH 值使灭菌后在25的pH 值为5.20.2加入孔雀绿分?#22467;?#28781;菌,灭菌温度不能超过115档

11木糖?#34507;?#37240;脱氧胆酸盐琼脂培养基

酵母浸出粉 3.0g         氯化钠 5.0g

L-?#34507;?#37240; 5.0g            硫代硫酸钠 6.8g

木糖 3.5g                 枸橼酸铁铵 0.8g

乳糖 7.5g                 酚红 80mg

蔗糖 7.5g                 琼脂 13.5g

脱氧胆酸钠 2.5g 纯化水 1000mL

除三种糖酚红琼脂外取上述成分混合微温溶解,调节pH 值使加?#32676;?#22312;25的pH 值为7.40.2加入三种糖酚红琼脂加热至沸腾冷至50倾注平皿不能在高压灭菌器中加热

12.三糖铁琼脂培养基TSI

胨 20.0g                 硫酸亚铁 0.2g

牛肉浸出粉 5.0g       硫代硫酸钠 0.2g

乳糖 10.0g              0.2%酚磺酞指示液 12.5ml

蔗糖 10.0g              琼脂 12.0g

葡萄糖 1.0g             纯化水 1000ml

氯化钠 5.0g

除三种糖0.2%酚磺酞指示液琼脂外取上述成分混合微温溶解, 调节pH 值使灭菌后在25的pH 值为7.30.1加入琼脂加热溶化后再加入其余各成分摇匀分?#22467;?#28781;菌制成高底层23cm短斜面

13溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基

明胶胰酶水解物 20.0g     ?#35270;?10mL

氯化镁 1.4g                   琼脂 13.6g

硫酸钾 10.0g                 溴化十六烷基三甲铵 0.3g

纯化水 1000mL

除琼脂外取上述成分混合微温溶解调节pH 使灭菌后在25的pH 值为7.40.2加入琼脂加热煮沸1 ?#31181;?#20998;?#22467;?#28781;菌

14甘露醇盐琼脂培养基

胰酪胨 5.0g                          氯化钠 75.0g

动物组织胃蛋白酶水解物 5.0g  酚红 25mg

牛肉浸出粉 1.0g                    琼脂 15.0g

D-甘露醇 10.0g                     纯化水 1000mL

除甘露醇酚红琼脂外取上述成分混合微温溶解调节pH 值使灭菌后在25的pH 值为7.40.2加热并振摇加入甘露醇酚红琼脂煮沸1 ?#31181;?#20998;?#22467;?#28781;菌

15梭菌增菌培养基培养基

胨 10.0g              盐酸半胱氨酸 0.5g

牛肉浸出粉 10.0g  乙酸钠 3.0g

酵母浸出粉 3.0g    氯化钠 5.0g

可溶性淀粉 1.0g    琼脂 0.5g

葡萄糖 5.0g          纯化水 1000mL

除葡萄糖外取上述成分混合加热煮沸使溶解并?#27426;?#25605;拌如需要调节pH 值使灭菌后在25的pH 值为6.80.2加入葡萄糖混匀分?#22467;?#28781;菌

16哥伦比亚琼脂培养基

胰酪胨 10.0g              玉米淀粉 1.0g

肉胃蛋白酶消化物 5.0g 氯化钠 5.0g

心胰酶消化物 3.0g       琼脂 10.015.0g依凝固力

酵母浸出粉 5.0g          纯化水 1000mL

除琼脂外取上述成分混合加热煮沸使溶解并?#27426;?#25605;拌如需要调节pH 值使灭菌后在25的pH 值为7.30.2加入琼脂加热溶化分?#22467;?#28781;菌如有必要灭菌后冷至4550加入相当于20mg 庆大霉素的无菌硫酸庆大霉素混匀倾注平皿

17. 念珠菌显色培养基

胨 10.2g        琼脂 15g

氢罂素 0.5g    灭菌水 1000ml

色素 22.0g

除琼脂外,取上述成分,混合,微温溶解,调节pH 值使灭菌后在25的pH 值为6.30.2?#26031;?#21152;入琼脂加热煮沸?#27426;?#25605;拌至琼脂完全溶解倾注平皿

说明

1.微生物限度检查法收载于中国药典一二三部附录中内容基本一致

2.本稿是2010 年版微生物限度检查中控制菌检查培养基准备的内容修订稿参照ICH 协调案非无菌产品微生物限度检查控制菌检查法进行修订

 


 

 

上一篇无菌检查法-2015版中国药典

下一篇非无菌产品微生物限度检查微生物计数法-2015中国药典

相关文章:
常见非无菌产品确认与验证流?#35848;?#22270; 非无菌产品微生物限度检查微生物计数法
非无菌产品微生物限度检查控制菌检查法 非无菌药品微生物限度标准2015中国药典
非无菌产品微生物限度检查微生物计数法-2015中国药典 中国药典2015年版-非无菌产品微生物检查法改动
首页 | 关于我们 |网上商城| 加入收藏 | 在线客服 | 网?#38236;?#22270;| 联系我们
地址青岛市李沧区龙水路318号D座
电?#22467;?00-0532-596 0532-66087773
6608776281935169

传真0532-81935080 66087775

?#27663;䣺[email protected]

QQ:4000532596

投诉与建议
电?#22467;?3105190021 13006536294
?#27663;䣺[email protected]
©2001- 版权所有 青岛高科技工业园海博生物技术有限公司 鲁ICP备05018323号
Ӱ߾糡1
aj1̰ Ŷ³ξĸ ɳ04Ϊʲôû ʮֿ ֲʿ Ϸ ǹ· 簲׿Ϸ ¬ά 3ſvsƷ