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常见产毒真菌的鉴定征求意见稿


录入时间:2016-3-14 10:55:50 来源青岛海博生物

1范围

本标准规定了食品中常见的产毒真菌的鉴定方法

 本标准适用于曲霉属青霉属镰?#27602;?#23646;及其它菌属中常见产毒菌种的鉴定

2设备和材料

除微生物实验室常规灭菌及培养设备外其他设备和材料如下

2.1 冰箱04

2.2 恒温培养箱2528

2.3 显微镜10100

2.4 目镜测微计

2.5 物镜测微计

2.6 无菌接种罩

2.7 放大镜

2.8接种勾针

2.9分离针

2.10载玻片

2.11盖玻片18mm18mm

2.12灭菌刀子

3培养基和试剂

3.1 乳酸-苯酚液 见附录AA.1

3.2 察氏培养基见附录AA.2

3.3 马铃薯-葡萄糖琼脂培养基见附录AA.3

3.4 麦芽汁琼脂培养基见附录AA.4

3.5 马铃薯-酵母膏-蔗糖培养基见附录AA.5

3.6 麦芽汁-酵母膏培养基见附录AA.6

3.7 麦芽汁-蛋白胨培养基见附录AA.7

3.8 大米培养基见附录AA.8

3.9 玉米培养基见附录AA.9

3.10 麦麸培养基见附录AA.10

检验程序

4.1 菌落的观察为了培养完整的巨大菌落以供观察记录可将纯培养物点植于平板上方法是将平板倒转向上接种一点或三点每菌接种两个平板倒置于2528温箱中进行培养?#22791;?#38271;出小菌落时取出一个平皿以无菌操作用特制不锈钢长柄小刀小刀3mmmm柄长19cm木制把手7cm将菌落连同培养基切下1cm2cm的小块置菌落一侧继续培养5d14d进行观察此法代替小培养法可观察子实体着生状态

4.2 斜面观察?#33322;?#30495;菌纯培养物划线接种(曲霉青霉)或点种(镰?#27602;?#25110;其它菌)于斜面培养5d14d观察菌落形态同时还可以将菌种管显微镜下用低?#27602;?#30452;接观察孢子的形态和排列

4.3 制片取载玻片加乳酸-苯酚液一滴接种针钩取一小块真菌培养物置乳酸-苯酚液中用两支分离针将培养物撕开成小块切忌涂抹以免破坏真菌结构然后加盖玻片如有气泡可在酒精灯上加热排除制片时在接种罩内操作以防孢子飞扬

4.4 镜检观察真菌的菌丝和孢子的形态和特征孢子的排列等并做详细记录

4.5 报告根据菌落形态及镜检结果参照以下各种真菌的形态描述确定菌种名称

5各属真菌的形态特征

5.1 曲霉属 (Aspergillus)

    本属的产毒真菌主要包括黄曲霉寄生曲霉赭曲霉黑曲霉炭黑曲霉和棒曲霉这些真菌的代谢产物为黄曲霉毒素赭曲霉毒素伏马菌素展青霉素

    曲霉属的颜色多样且比较稳定营养菌丝体由具横隔的?#31181;?#33740;丝构成无色或有明亮的颜色一部分埋伏型一部?#21046;?#29983;型分生孢子梗大都无横隔光滑?#26893;?#25110;?#26032;?#28857;梗的顶端膨大形成棍棒形椭?#27531;Ρ?#21322;球形或球形的顶囊在顶囊上生出一层或二层梗双层时下面一层为梗基每个梗基?#26174;?#30528;生两个或几个梗?#29992;?#20010;小梗的顶端相继生出一串分生孢子由顶囊梗以及分生孢子链构成一个头状体的结构称为分生孢子头分生孢子头有各?#26893;?#21516;颜色和形状如球形放射形棍棒形或直柱形?#21462;?#26354;霉属只少数?#20013;?#25104;?#34892;?#38454;段产生封闭式的闭囊壳某些种产生菌核或菌核结构少数种可产生不同形状的壳细胞

5.1.1 黄曲霉 (A.flavus)

    属于黄曲霉群在氏琼脂培养基上菌落生长较快10 d14 d?#26412;?/span>3 cm4 cm6cm7 cm最初带黄色然后变为黄绿色老后颜色变暗平坦或有放射状?#28404;ƣ?#21453;面无色或带褐色在低倍显微镜下观察可见分生孢子头疏松放射状继变为疏松柱状分生孢子梗多从基质生出长度一般小于1 mm?#34892;?#33740;丝产生带褐色的菌核制片镜检观察可见分生孢子梗极?#26893;ڣ本?/span>10 mm20 mm顶囊烧瓶形或近球形?#26412;?/span>10 mm65 mm一般多25 mm45 mm全部顶囊着生梗单层双层或单双层同时生在一个顶囊上?#36824;?#22522; 6 mm10 mm4 mm5.5mm小梗 6.5 mm10 mm3 mm5 mm分生孢子球形近球形或稍作洋梨形3 mm6 mm?#26893;?/span>(见图1)

黄曲霉的一些菌株可产生黄曲霉毒素该毒素能引起动物急性中毒死亡如长期食用含微量黄曲霉毒素的食物能引起肝癌

    

5.1.2 寄生曲霉 (A.parasiticus)

    亦属于黄曲霉?#28023;?#22312;氏琼脂培养基上8 d10 d菌落2.5 cm4 cm平坦或带放射状?#28404;ƣ资?#24102;黄色老后呈暗绿色反面奶油色至淡褐色低倍显微镜下观察见分生孢子头疏松放射状?#26412;?/span>400 mm500 mm分生孢子长短不一一般为200 mm1000 mm制片镜检观察见分生孢子梗光滑或?#26893;ڣ?#36817;顶囊处宽10 mm12 mm顶囊近球形或烧瓶形或杵状?#26412;?/span>20 mm35 mm梗单层7 mm9 mm3 mm4 mm排列紧密分生孢子球形极?#26893;ڣ?#20855;小刺?#26412;?/span>3.5 mm5.5 mm未报道过产生菌核

    寄生曲霉的菌株?#23492;?#20135;生黄曲霉毒素

5.1.3 杂色曲霉 (A.versicolor)

    属于杂色曲霉群在查氏琼脂培养基上菌落生长局限14d?#26412;?/span>2cm3cm绒状絮状或两者同时存在颜色变化范围相当广?#28023;?#19981;同菌系可能?#26893;?#28129;绿灰绿浅黄甚至粉红色反面近于无色至黄橙色或?#20498;?#33394;有的菌落有无色至紫红色的液滴分生孢子头疏松放射状大小为100 mm125 mm分生孢子梗长度可达500 mm700 mm12 mm16 mm,光滑无色或?#28304;?#40644;色顶囊半椭?#27531;?#33267;半球形上半部或四?#31181;?#19977;部位上着生小梗瓶梗双层梗基 5.5 mm8 mm3mm瓶梗 5 mm7.5mm2 mm2.5 mm分生孢子球形?#26893;ڣ本?/span>2.5 mm3 mm或稍大?#34892;?#33740;系产生球形的壳细胞(见图2)

杂色曲霉产生杂色曲霉素该毒素引起肝和肾的损害并能引起肝癌

 

5.1.4 构巢曲霉(A.nidulans)

    属于构巢曲霉群氏琼脂培养基上菌落生长较快14 d?#26412;?/span>5 cm6 cm绒状绿色有的菌系由于产生较多的闭囊壳而显现黄褐色反面紫红色分生孢子?#33539;?#26609;形40 mm80 mm25 mm40 mm分生孢子梗极短常弯曲一般75 mm100 mm近顶囊处?#26412;?/span>3.5 mm5 mm褐色壁光滑顶囊半球形?#26412;?/span>8 mm10 mm瓶梗双层梗基5 mm6 mm2 mm3 mm瓶梗5 mm6 mm2 mm2.5 mm分生孢子球形?#26893;ڣ本?/span>3 mm3.5 mm闭囊壳球形暗紫红色?#26412;?/span>135 mm150 mm子囊孢子双凸镜形紫红色约5 mm4 mm有两个鸡冠状突起闭囊壳外面包围着一层壳细胞淡黄色球形壁厚?#26412;?#30340;25 mm(见图3)

    构巢曲霉产生杂色曲霉素

 

5.1.5 赭曲霉 (A.ochraceus)

    属于赭曲霉群在氏琼脂培养基上菌落生长稍局限10 d14 d?#26412;?/span>3 cm4 cm褐色或浅黄色基质中菌丝无色具有不同程度的黄色或紫色反面带黄褐色或绿褐色分生孢子?#37210;资?#29699;形老后分裂成23个柱状?#26893;?#20998;生孢子梗长1 mm1.5 mm?#26412;?/span>10 mm14 mm带黄色极?#26893;ڣ?#26377;明显的麻点顶囊球形?#26412;?/span>30 mm5mm或更大梗双层自顶囊全部表面密集着生基一般15mm~20mm5 mm~6 mm瓶梗mm~11 mm2mm~3.3 mm分生孢子球形?#20004;?#29699;形?#26412;?/span>2.5 mm3 mm或更大常?#28304;植ڡ行?#33740;系产生较多的菌核初期为白色老后淡紫色球形?#30740;?#33267;柱形?#26412;?#36798;1 mm(见图4)

赭曲霉的一些菌株可产生赭曲霉毒素该毒素是一种强的肾脏毒和肝脏毒

 

5.1.6 黑曲霉 (A.niger)

    属于黑曲霉群在氏琼脂培养基上菌落生长稍局限10 d14 d?#26412;?#21487;达2.5 cm3 cm菌丝初为白色常出现鲜黄色区域厚绒状黑色反面无色或中央部分?#28304;?#40644;褐色分生孢子?#37210;资?#29699;形渐变为放射形或裂成几个放射的柱状物一般为700 mm800 mm褐黑色分生孢子梗自基质生出长短不一一般为1 mm3 mm?#26412;?/span>15 mm20 mm壁厚光滑顶囊球形一般?#26412;?#20026;45 mm75 mm梗双层自顶囊全部着生褐色梗基一般为20 mm30 mm5 mm6 mm长者可达60 mm70 mm8 mm10 mm有?#26412;?#27178;隔7 mm10 mm3 mm3.5 mm分生孢子球形?#26412;?#22823;多4 mm5 mm褐色色素积于内壁和外壁间成为短棍状或块状而显现?#26893;ڡ?#26377;的菌系产生菌核球形白色?#26412;?/span>1 mm(见图5)

黑曲霉的一些菌株可产生B族伏马菌素

         

5.1.7 炭黑曲霉 (A.carbonarius)

属于黑曲霉群菌落在查氏培养基上生长迅速25 7 d?#26412;?/span>40 mm~60 mm平?#26775;?#36136;地丝绒状有的菌株有较多的气生菌丝分生孢子结构大量有时在边缘处或近边缘处较少分生孢子头纯黑色具少量无色渗出液或无稍具不明显的霉味菌落反面淡黄色至黄褐色或在中部呈黄?#31181;?#35088;黑色分生孢子头初为球形?#26412;?/span>100 mm ~300 mm~500 mm老时分裂成几个圆柱形结构?#26412;?#21487;达1000 mm或更大分生孢子梗发生于基质孢梗茎(2000 mm ~4500 mm)(20 mm ~30 mm~40mm)无色透明老时近顶囊部分带黄色或淡褐色壁平滑?#27426;?#22218;球形或近球形?#26412;?/span>70 mm~80 mm~120mm老时带褐色全部表面可育产孢结构双层梗基在一定时间范围内随着菌龄的增加而增大通常20 mm ~50 mm5mm ~mm~13mm)大者可长达80 mm老时呈褐色?#40644;?#26775;mm ~12 mm~15mm)mm ~mm~8mm分生孢子球形近球形?#26412;?span>6 mm ~mm壁显著?#26893;ڣ?#32769;后呈尖疣状或疣状文献报道偶尔产生菌核

炭黑曲霉的一些菌株可产生伏马菌素和赭曲霉毒素

5.1.8 棒曲霉 (A.clavauts)

属于棒曲霉群菌落在查氏培养基上生长快?#26412;?span>10 d可达3 cm5 cm绒状或形成很厚的毡状有的?#28304;?#30385;纹带蓝灰绿色有的菌系有显著的腐臭分生孢子头初形成时为棍棒形老后裂开成几个短柱分生孢子梗粗大长1.5 mm3 mm?#26412;?/span>20 mm30 mm光滑无色顶囊稍膨大形成棍棒状顶囊顶?#39029;?#36798;200 mm300 mm40 mm60 mm小梗单层密集生于顶?#21494;?#37096;者一般为7 mm8 mm2.5 mm3.0 mm生于下部者2.5 mm3.5 mm2 mm3 mm分生孢子椭?#27531;Σ?#20809;滑3 mm4.5 mm2.5 mm3.5 mm(见图6)

棒曲霉的一些菌株可产生展青霉素

 

5.2 青霉属 (Penicillium)

    本属产毒真菌主要包括桔青霉?#19981;?#38738;霉展开青霉纯绿青霉?#21462;?#36825;些真菌的代谢产物为桔青霉素?#19981;?#20598;氮酸展青霉素?#21462;?/span>

    青霉属的营养菌丝体呈无色淡色或鲜明的颜色具横隔或为埋伏型或部分埋伏型部?#21046;?#29983;型气生菌丝?#33527;?#29366;松絮状或部分结成菌丝索分生孢子梗由埋伏型或气生型菌丝生出?#28304;?#30452;于该菌丝(除个别种外不象曲霉那样生有足细胞)单独直立或作?#25345;?#31243;度的集合及至密集为一定的菌丝束具横隔光滑或?#26893;ڡ?#20854;先端生有扫帚状的?#31181;?#36718;称为帚状枝帚状枝是由单轮或两次到多次?#31181;?#31995;统构成对称或?#27426;?#31216;最后一级?#31181;?#21363;产生孢子的细胞称为小梗着生小梗的细胞叫梗基支持梗基的细胞称为副枝小梗用断离法产生分生孢子形成不?#31181;?#30340;链分生孢子呈球形椭?#27531;?#25110;短柱形光滑或?#26893;ڣ?#22823;部分生长时呈蓝绿色有时呈无色或?#26102;?#31181;淡色但决不呈污黑色少数种产生闭囊壳或结构疏松柔软较快地形成子囊和子囊孢子或质地坚硬如菌核状由中央向外缓慢地成熟还有少数菌产生菌核

5.2.1 桔青霉 (P.citrinum)

    属于?#27426;?#31216;青霉组绒状青霉亚组桔青霉系菌落生长局限10 d14 d?#26412;?/span>2 cm2.5 cm有放射状?#28404;ƣ?#22823;多数菌系为绒状另一些则?#27663;中?#29366;艾绿色反面黄色至橙色与培养基颜色相仿或带粉红色渗出液?#23454;?#40644;色低倍显微镜下分生孢子链为明确的分散柱状分生孢子梗大多自基质生出也有自菌落中央气生菌丝生出者一般50 mm200 mm2.2 mm3 mm壁光滑,一般不?#31181;?#24090;状枝由34个轮生而略散开的梗基构成12 mm20 mm2.2 mm3 mm每个梗基上簇生610个略密集而平行的小梗8 mm11 mm2.2 mm2.8 mm分生孢子呈球形或近球形?#26412;?/span>2.2 mm3.2 mm光滑或近于光滑(见图7)

桔青霉的一些菌株产生桔青霉毒素该毒素是一种强的肾脏毒

 

                                 

5.2.2 ?#19981;?#38738;霉 (P.cyclopium)

    属于?#27426;?#31216;青霉组束状青霉亚组?#19981;?#38738;霉系菌落生长较快12 d14 d?#26412;?/span>4.5 cm5 cm?#28304;?#25918;射状皱纹老后或显?#21482;?#32441;?#36947;?#32511;色在生长期有宽1 mm2 mm白色边缘质地绒状或粉粒状但在较幼区域为显著束状渗出?#20309;?#25110;较多色淡反面无色或初期带黄色,继变为?#32676;?#33394;帚状枝?#27426;?#31216;紧密常具三层?#31181;?#32422;50 mm60 mm,上生纠缠的分生孢子链分生孢子梗大多200 mm400 mm3 mm3.5 mm典型地?#26893;ڣ?#20294;也有一些菌系近于光滑副枝15 mm30 mm2.5 mm3.5 m梗基10 mm15 mm2.5 mm3.3 mm小梗48个轮生7 mm10 mm2.2 mm2.8 mm分生孢子大多近球形3 mm4 mm,光滑或略现?#26893;?/span>(见图8)

?#19981;?#38738;霉的代谢产物为?#19981;?#20598;氮酸,该毒素是一种神经素   

 

5.2.3 展开青霉 P.patulum异名:荨麻青霉 P.urticae

    属于?#27426;?#31216;青霉组束状青霉亚组在察氏琼脂培养基上,菌落生长局限12 d14 d?#26412;?/span>2 cm2.5 cm大多有放射状?#28404;ƣ?#36793;?#20992;盖ͣ?#20013;央稍凸起表面?#27663;至?#29366;?#34892;?#22312;边缘有明显的菌丝束有的则?#27663;中?#29366;,厚密灰绿色?#20142;?#28784;色有的菌系产生近于无色的渗出?#28023;?#27668;味不明显反面暗黄色渐变为?#32676;?#33394;乃至红褐色稍扩散于培养基中帚状枝疏松散开可具34层?#31181;?#20854;大小和复杂程度差别很大,一般40 mm55 mm极限20 mm80 mm分生孢子链略散开长达50 mm100 mm分生孢子梗一部分单生一部分集结成束多弯曲壁光滑,一般400 mm520 mm3 mm4 mm副枝散开大多15 mm20 mm3 mm3.5 mm梗基较短大多为7 mm9 mm3 mm3.5 mm小梗短4.5 mm6.5 mm2 mm2.5 mm810个密集一簇分生孢子椭?#27531;Σ?#21518;变为近球形长轴2.5 mm3 mm光滑(见图9)

展开青霉的一些菌株产生展青霉素该毒素能引起动物中毒死亡皮下反复注射展青霉素可引起注射部位的肉瘤展青霉素也是一种神经毒

5.2.4 纯绿青霉 P.viridicatum 

    属于?#27426;?#31216;青霉组束状青霉亚组纯绿青霉系菌落生长局限12 d14 d?#26412;?/span>2.5 cm3.5 cm亮黄绿色有时有狭的带蓝绿色的带紧邻于白色边缘的内侧极厚通常为显著的粒状,老年时变为浊褐色反面纯淡黄色纯褐色帚状枝正常的有三层?#31181;?/span>,常常副枝及梗基生在同一高?#21462;?#20998;生孢子梗大部?#31181;本?/span>3.5 mm4.5 mm但有时达6 mm?#26893;?#33267;很?#26893;ڡ?#23567;梗7 mm10 mm2.5 mm3 mm分生孢子椭?#27531;Σ?#36798;4.5 mm3.3 mm或亚球形?#26412;?#32422;3.5 mm?#28304;植ڣ?#25104;纠缠链状或不确定的直柱状(见图10)

纯绿青霉的一些菌株可产生赭曲霉毒素和桔青霉素

5.3 镰?#27602;?#23646; Fusarium

本属的产毒霉菌主要包括?#22374;?#38256;?#27602;?#20018;珠镰?#27602;?#38634;腐镰?#27602;?#19977;线镰?#27602;?#26792;孢镰?#27602;?#25311;枝孢镰?#27602;?#23574;孢镰?#27602;?#33540;病镰?#27602;?#21644;木贼镰?#27602;取?#36825;些霉菌的代谢产物为单端孢霉烯族化合物玉米赤霉烯酮和丁烯酸内酯?#21462;?/span>

在马铃薯葡萄糖琼脂或察氏培养基上气生菌丝发达高0.5 cm1.0 cm或?#31995;?#20026;0.3 cm0.5 cm或更低为0.1 cm0.2 cm稀疏的气生菌丝甚至完全无气生菌丝而由基质菌丝直接生出粘孢层内含大量的分生孢子大多数?#20013;?#22411;分生孢子通常假头状着生较少为链状着生或者假头状和链状着生兼有小型分生孢子生于?#31181;?#25110;不?#31181;?#30340;分生子梗上形状多样?#30740;Ρ?#26792;形椭?#27531;Ρ?#38271;椭?#27531;Ρ?#32442;锤形披针形腊肠形柱形锥形逗点形?#27531;ε取?/span>12(3)隔通常小型分生孢子的量较大型分生孢子为多大型分生孢子产生在菌丝的短小爪状突起上或产生在分生孢子座上或产生在粘孢团中大型分生孢?#26377;?#24577;多样镰刀形线形纺锤形披针形柱形腊肠形蠕虫形鳗鱼形弯曲直或近于直顶端细胞多?#20013;?#24577;?#22871;?#24418;锥形钩形线形柱形逐渐变窄细或突然收缩气生菌丝子座粘粘团菌核可呈各种颜色基质亦可被染成各种颜色厚垣孢子间生或顶生单生或多个成串或成结节状有时也生于大型分生孢子的孢室中无色或具有各种颜色光滑或?#26893;ڡ?/span>

镰?#27602;?#23646;的一些种当初次分离时只产生菌丝体常常还需诱发产生正常的大型分生孢子以供鉴定因此须同时接种无糖马铃薯琼脂培养基或察氏培养基?#21462;?/span>

5.3.1 串珠镰?#27602;?nbsp;(F.moniliforme)

    在马铃薯葡萄糖琼脂培养基上气生菌丝呈棉絮状,蔓延,0.2 cm0.8 cm,?#34892;?#33740;株平铺或?#26893;?#20302;陷,试管壁或菌落中央有一定程度的绳状或束状的趋势气生菌丝的色泽随菌株及培养基而异白色浅粉红色淡紫色基质反面为?#31995;?#30340;黄赭紫红乃至蓝色,或它们之间的颜色野生型菌株一般产孢子良好,在气生菌丝层上见有一层稍稍反光的松散的细粉就是散落成堆的孢子某些菌株在菌落中央产生粉红色粉红肉桂色的粘孢团,个别菌株则为?#36947;?#33394;,粘孢团含大量的小型分生孢子及较多的大型分生孢子

    小型分生孢子呈椭?#27531;Ρ?#32442;锤形?#30740;Ρ?#26792;形腊肠形透明单细胞或有12个隔直或稍弯3 mm7(14)mm2 mm4.8 mm液体培养时较大为9 mm18 mm2.5 mm6 mm小型分生孢子成串或假头状(见图11)

   大型分生孢子为镰刀形纺锤形棍棒形线形直或稍弯孢子两端窄细或粗细均一,或?#27426;?#36739;锐透明壁薄一般多为36个隔7隔者罕见

    3 隔的大小平均为36 mm3 mm

    5 隔的大小平均为49 mm3.1 mm

    6 隔的大小平均为56 mm60 mm4.5 mm4.8 mm

    在马铃薯培养基上?#34892;?#33740;株可产生子座,呈黄色褐色或紫色?#34892;?#33740;株还可形成菌核

    子囊阶段:藤仓赤霉

串珠镰?#27602;?#20027;要寄生于?#22374;?#31867;作物,如稻?#21462;?#29976;蔗玉米和高?#22351;?/span>,其代谢产物为串珠镰?#27602;?#32032;和玉米赤霉烯酮

5.3.2 ?#22374;?#38256;?#27602;?nbsp;F.graminearum

    菌株在马铃薯-葡萄糖琼脂培养基上菌丝棉絮状?#20102;?#29366;,生长茂盛,高度可达5 mm7 mm初期白色然后白-?#20498;?#33394;白-洋红色或白-砖红色中央常遗留黄色气生菌丝区反面深洋红色或淡砖红-赭色菌丝?#31181;?#26377;隔透明或浅?#20498;?#33394;?#26412;?/span>1.5 mm5 mm一般野生型菌株在培养基上不产生孢子但在菌丝中可见膨大细胞膨大细胞球形或?#30740;Σ?#21333;个或成串顶生或间生壁薄透明?#26412;?/span>6 mm12(14) mm大型分生孢子近镰刀形纺锤形披针形稍弯两端稍窄细顶端细胞末端稍尖或略钝脚胞有或无,大多数35隔极少数12隔或67(9)隔单个孢子无色聚集时?#26159;?#31881;红色(见图12)

    大型孢子  3   28 mm40mmmm5mm (25~mm~47mm3.3~6mm              

                30 mm55mmmm4.5mm (28~mm~60mm3.3~6mm          

              67 45mm60mm4.5~6 mm (40mm~70mm4~6.5mm 

    本种无小型分生孢子一般无厚垣孢子如有也极少间生

    子囊阶段:玉米赤霉

?#22374;?#38256;?#27602;?#26159;赤霉病麦的主要病原菌,主要引起小麦大麦和元麦的赤霉病?#22374;?#38256;?#27602;?#36824;可以感染玉米和水?#38236;x?#33021;产生T-2毒素脱氧雪腐镰?#27602;?#28911;醇和玉米赤霉烯酮?#21462;?/span>

5.3.3 三线镰?#27602;?/span>F.tricinctum

    在马铃薯葡萄糖琼脂培养基上,气生菌丝生长茂盛棉絮状呈白色洋红色红色至紫色小型分生孢子散生在气生菌丝中或聚成假头状梨形或柠檬形?#30740;?/span>-椭?#27531;Σ?#32442;?#38468;?#25259;针形或稍呈镰刀形01隔大型分生孢子生于分生孢子梗座及气生菌丝中镰状弯曲或椭?#27531;?#24367;曲,脚胞很明显35

    3  26 mm38 mm3 mm4.7 mm

    5  34 mm53 mm3 mm4.8 m

    厚垣孢子呈球形壁光滑间生单生或成串(见图13)

本菌主要寄生于玉米和小麦的种子上可产生T-2毒素丁烯酸内酯二乙酸镳草镰?#27602;?#28911;醇和玉米赤霉烯酮

5.3.4 雪腐镰?#27602;?nbsp;F.nivale

    在马铃薯-葡萄糖琼脂培养基上菌落呈白色?#31243;?#32418;色粉红色?#21015;?#40644;色;基质稍?#26159;?#40644;色菌丝?#27663;?#30095;的棉絮状?#33000;?#29366;生长速度:4 d后平均菌落?#26412;?#36229;过1 cm以上在4低温发育良好培养7 d10 d可检见分生孢子分生孢子直接产生于气生菌丝中但在某些菌株中分生孢子可自小的分生孢子梗座上生出粘孢团?#36848;?#27225;色浅橙色干时呈肉桂色菌丝?#26412;?/span>1.5 mm5 mm瓶状小梗7 mm9 mm2.5 mm3 mm分生孢子纺锤-镰刀?#26009;?#32928;形弯曲两端渐变窄末端钝?#29627;?#22522;部无脚胞有时呈楔状典型的有(0)13(见图14)

    0   5 mm8 mm2 mm4 mm 

    1   9 mm23 mm2.2 mm4.5 mm

    3   13 mm16 mm2.3 mm4.5 mm

    本菌无厚垣孢子子座小透明呈粉红?#30967;?#32418;色后期变为革褐色

    子囊阶段雪腐丽赤壳

雪腐镰?#27602;?#22312;小麦大麦和玉米等谷物上生长可产生镰?#27602;?#28911;酮-X雪腐镰?#27602;?#28911;醇和二乙酸雪腐镰?#27602;?#28911;醇等有毒代谢产物

5.3.5 梨孢镰?#27602;?nbsp;F.poae

    菌株在马铃薯-葡萄糖琼脂上,气生菌丝生长良好?#33000;?#29366;丝状有时带粉状高可达7 mm8 mm,苍白-?#20498;?#33394;浅粉红色洋红色洋红赭色反面呈深浅不同的洋红色或浅紫洋红色菌丝?#31181;?#26377;隔透明?#26412;?/span>1.5 mm3(5) mm菌丝及分生孢子梗的?#31181;?#24120;对生及轮生小型分生孢子通常假头状着生有?#20493;?#38142;状分生孢子脱落后使菌丝层撒铺为细粉状小型分生孢子球形梨形柠檬形倒?#30740;加?#21183;还?#22411;残Ρ?#32442;锤形窄?#29486;有?#30340;小型分生孢子01隔透明光滑球形孢子?#26412;?/span>4 mm8 mm其他形状的小孢子无隔 mm10 mmmm6mm (5mm12 mm2.5mmmm

    1  12 mm20 mmmm6.5 mmmm26 mm2.5 mm mm大型分生孢子镰刀形披针形纺锤形椭?#27531;?#24367;曲或近直脚胞不明显少数有具乳头状突起的脚胞25隔光滑透明

    2  1530 mm2.5 mm5 mm

    3  19 mm30(35) mm3.3 mm5(5.5) mm

    5  30 mm36(40) mm4 mm5.2(6) mm

    厚垣孢子矩圆-椭圆或似椭?#27531;Σ?#22810;数间生少数顶生单生或数个成串或结节状赭黄色(见图15)

梨孢镰?#27602;?#20027;要寄生于谷类可产生T-2毒素新茄病镰?#27602;?#28911;醇和丁烯酸内酯?#21462;?/span>

5.3.6 拟枝孢镰?#27602;?nbsp;F. sporotricoides

    在马铃薯-葡萄糖琼脂培养基上气生菌丝生长茂盛棉絮状表面稍呈粉状初为白色很快变为樱桃红色菌落反面呈暗紫红色小型分生孢子自分生孢子梗的假?#31181;?/span>(多芽产孢细胞)上形成通常稍稀疏小型分生孢子球形梨形椭?#27531;Ρ?#36817;披针形或近镰刀形01隔大型分生孢子产于气生菌丝或分生孢子梗座中镰刀形纺锤-镰刀形披针形弯曲有脚胞35

    3   22 mm35 mm3.6 mm4.7 mm

    5   37 mm45 mm4.0 mm5.2 mm

    厚垣孢子间生,单个或成对,结节状或成串(见图16)

本菌主要寄生于小麦燕麦玉米和甜?#31995;?#20316;物能产生T-2毒素丁烯酸内酯和新茄病镰?#27602;?#28911;醇

5.3.木贼镰?#27602;?nbsp;F.equiseti

    在马铃薯-葡萄糖琼脂培养基上气生菌丝生长较快棉絮状白色乳黄色至褐色缺乏真正的小型分生孢子大型分生孢子纺锤-镰刀形弧弓形披针形鳗鱼状弯曲抛物线形弯曲双曲线形弯曲或近于直中央细胞明显膨大顶端细胞窄细成长刺或线状脚胞明显47

    3  22 mm45 mm3.5 mm5 mm

    5  40 mm58 mm3.7 mm5 mm

    7  42 mm60 mm4 mm5.9 mm

    厚垣孢子间生于菌丝中成串或成结节状有极粗的疣状突起或光滑黄褐色或透明单个厚垣孢子?#26412;?/span>6 mm10 mm见图17

    子囊阶段错综赤霉

木贼镰?#27602;?#20027;要寄生于大豆种子和幼苗小麦大麦和黑麦上能产生二醋酸镳草镰?#27602;?#28911;醇 玉米赤霉烯酮新茄病镰?#27602;?#28911;醇和丁烯酸内酯

5.3.8 茄病镰?#27602;?nbsp;F.solani

    菌株在马铃薯葡萄糖琼脂培养基上气生菌丝生长良好棉絮状低平或?#33000;?#29366;稍高在试管壁上常有编结成菌?#21487;?#30340;趋势白色苍白-浅紫色苍白-浅赭色苍白-浅黄色反面浅赭色浅赭-?#36947;?#33394;浅黄奶油色气生菌丝的粘孢团有或无如有则呈白褐黄蓝绿色或它们之间的颜色

    小型分生孢子假头状着生椭?#27531;Σ?#21365;?#27531;Ρ?#38271;椭?#27531;Ρ?#30701;腊肠形逗点形01隔光滑4 mm15 mm?#31890;?/span>3 mm5 mm变化幅度3 mm19 mm2 mm6 mm

    大型分生孢子近镰刀形纺锤-镰刀形纺锤披针形纺锤-柱形稍弯极个别菌株有双曲线弯曲的大型孢子在很大距离的长度上?#26412;?#30456;?#21462;?#39030;端细胞短稍窄细或变钝脚胞有或无大型分生孢子壁显著厚25(7)隔以3隔居多

    3  17 mm44(52) mm4 mm5(7) mm

    4 35 mm55(60) mm4.5 mm5.5(7) mm

    6 45 mm65(70) mm5 mm6.5(7.2) mm

    厚垣孢子顶生或间生单细胞或双细胞在较少数的菌株则?#35782;?#38142;或结节状,表面光滑或小疣状突起浅黄赭色或无色单细胞的厚垣孢子通常?#27531;?#25110;椭?#27531;Σ本?#32422;7 mm14(16) mm (见图18)

    子囊阶段红壳赤壳

茄病镰?#27602;?#33021;产生新茄病镰?#27602;?#28911;醇和玉米赤霉烯酮

5.3.尖孢镰?#27602;?/span>F.oxysporum

    菌株在马铃薯-葡萄糖琼脂培养基上,气生菌丝生长良好棉絮状或?#33000;?#29366;通常白色苍白-?#20498;?#33394;浅奶?#31361;?#33394;浅?#20498;?/span>-赤红色浅紫或苍白-浅紫色反面无 色浅赭色或微灰-浅紫色浅赭-?#20498;?#33394;气生菌丝有或无编结成绳状的趋势在气生菌丝上的粘孢团有或无粘孢团无色或浅?#20498;?#36205;蓝色菌核有或无如有则为绿-蓝黑色或其他色?#26412;?#32422;0.5 mm0.6 mm气生菌丝有隔?#31181;?#36879;明?#26412;?/span>1.5 mm3(5) mm小型分生孢子生于气生菌丝中假头状着生或生于粘孢团中小型分生孢?#26377;?#29366;可以是椭?#27531;Ρ?#32442;锤-椭?#27531;Ρ?#36817;柱形窄腊肠形逗点形拟肾形?#30740;Σ?#20855;01隔透明光滑 mm14 mmmmmm(4 mm18 mm1.8~3.5 mm)大型分生孢子纺锤形镰刀形椭?#27531;?#24367;曲顶端细胞较长逐渐窄细稍尖很尖或稍窄钝脚胞有或无孢壁薄有(1)35隔有的多达7

    3   23 mm45mm2.5 mm3.5mm16mm50mm2mm~4.5mm

    5   30 mm40mm mm4mm (22mm55mm2.24.8 mm

    6 50 mm55mmmm4mm (45mm60mm4.8 mm

    菌丝中的厚垣孢子顶生或间生单细胞或双细胞光滑或?#26893;?#25110;有疣状突起单细胞的厚垣孢子?#27531;?#25110;矩?#27531;Σ本?#32422;5 mm13(16) mm (见图19)

尖孢镰?#27602;?#21487;寄生于玉米小麦和大麦的种子上可产生玉米赤霉烯酮和T-2毒素

5.4 木霉属 Trichoderma

    木霉生长迅菌落棉絮状或致密丛束状产孢丛束区常排列成同心轮纹菌落表面颜色为不同程度的绿色?#34892;?#33740;株由于产孢子不?#25216;?#20046;白色菌落反面无色或有色气味有或无菌丝透明有隔?#31181;?#32321;复厚垣孢子有或无间生于菌丝中或顶生于菌丝短侧?#31181;?#19978;球形椭?#27531;Ρ?#26080;色壁光滑分生孢子梗为菌丝的短侧枝其上对生或互生?#31181;种?#19978;又可继续?#31181;?#24418;成二级三级?#31181;?span>,终而形成似松柏式的?#31181;?#36718;廓?#31181;?#35282;度为锐角或几乎?#33519;?#26463;生对生互生或单生瓶状小梗?#31181;?#30340;末端即为小梗但有的菌株主梗的末端为一鞭状而弯曲不孕菌丝分生孢子由小梗相继生出而靠粘液把它们聚成球形或近球形的孢子头有时几个孢子头汇成一个大的孢子头分生孢子近球形或椭?#27531;Ρ?#22278;?#27531;Ρ?#20498;?#30740;?#31561;壁光滑或?#26893;ڣ?#36879;明或亮黄绿色(见图20)

木霉属中里氏木霉T.reesei和绿色木霉T.viride的一些菌株产生木霉素属于单端孢霉烯族化合物

5.5 头孢霉属 Cephalosporium

    在合成培养基及马铃薯-葡萄糖琼脂培养基上各个种的菌落类型不一?#34892;?#31181;缺乏气生菌丝湿润或呈细菌状菌落?#34892;制?#29983;菌丝发达?#21980;?#27611;状或絮状菌落或有明显的绳状菌丝索或孢梗束菌落的色泽可由粉红至深红白灰色或黄色营养菌?#20811;?#29366;有隔?#31181;?/span>,无色或鲜色或者在少数情况下由于盛产厚垣孢子而呈暗色菌丝常编结成绳状或孢梗束分生孢子梗很短大多数从气生菌丝上生出基?#21487;?#33192;大呈瓶状结构互生对生或轮生分生孢子从瓶状小梗顶端溢出后推至侧旁靠粘液把它们粘成假头状遇水即散开成熟的孢子近?#27531;Ρ研Ρ?#26925;?#27531;?#25110;圆柱形,单细胞或偶尔有一隔透明(见图21)?#34892;?#31181;具?#34892;?#38454;段可形成子囊壳

头孢霉的一些菌株能引起芹菜大?#36141;透?#34071;等的植物病害它所产生的毒素属于单端孢霉烯族化合物

5.6 单端孢霉属 Trichothecium

    本属菌落薄絮状蔓延分生孢子梗直立有隔不?#31181;?#20998;生孢子24室透明或淡粉红色分生孢子是以向基式连续形成的?#38382;?#20135;生的孢子靠着生痕彼此连接成串分生孢子梨形或倒?#30740;Σ?#20004;胞室的孢子上胞室较大下胞室基端明显收缩变细着生痕在基端或其一侧(见图22)

该类菌的一些菌株能产生单端孢霉素为有毒性的单端孢霉烯族化合物

5.7 葡萄?#27492;?#38665;属 Stachybotrys

    葡萄?#27492;?#38665;菌丝匍匐蔓延有隔?#31181;?#36879;明或稍有色分生孢子梗从菌丝直立生出最初透明然后烟褐色规则地互生?#31181;?#25110;不规则?#31181;?#27599;个?#31181;?#30340;末端生瓶状小梗透明或浅褐色在?#31181;?#26411;端单生两个对生至数个轮生分生孢子单个地生在瓶状小梗的末端椭?#27531;Ρ?#36817;柱形或?#30740;Σ岛?#33394;有?#22871;?#31361;起(见图23)

该菌的一些菌株产生黑葡萄?#27492;?#38665;毒素属于单端孢霉烯族化合物能使牲畜特别是马中毒症状是口?#24359;?#40763;腔粘膜溃烂颗粒性白血球减少死亡接触有毒草料的人出?#21046;?#32932;炎?#27663;?#28814;血性?#33540;ס?/span>

5.8 交链孢霉属 Alternaria

    交链孢霉的不育菌丝匍匐分隔分生孢子梗单生或成簇大多不?#31181;?#36739;短与营养菌丝几乎无区别分生孢子倒棒状顶?#25628;?#38271;成喙状淡褐色有壁砖状分隔?#23707;?#33394;成链生长孢?#26377;?#24577;及大小极不规律(见图24)

的一些菌株能产生交链孢酚交链孢酚单甲醚细交链孢菌酮酸交链孢毒素1交链孢毒素2交链孢毒素3腾毒交链孢烯真菌毒素

5.9 节菱孢属 Arthrinium

在马铃薯-葡萄糖琼脂培养基上菌落生长蔓延5 d6 ?#26412;?#36798;9 cm白色或?#28304;?#40644;色絮状背面(基质菌丝)微黄至深褐有的菌落中间呈褐色背面黑褐色有的菌落带粉红色有的菌丝较稀疏,并具有大量黑色孢子团分生孢子梗从母细胞垂直于菌丝而生出分生孢子项生或侧生孢子褐色光滑双凸镜形正面?#26412;?/span>6.8 mm13.3 mm侧面厚度4.0 mm10.0 mm有的菌株具有腊肠形孢子褐色光滑大小为10.6 mm14.7 mm)4.0 mm5.3 mm(见图25)

?#27308;?#30340;甘蔗节菱孢A.saccharicola和蔗生节菱孢A.phaeospermum中的一些菌株能产生-硝基丙酸

5.10 红曲菌 Monascus 

   红曲菌在麦芽汁琼脂培养基上生长良好菌落初为白色老熟后变为淡粉色紫红色或?#28082;?#33394;因种而异通常这类菌?#23492;?#24418;成红色色素甚至分泌到培养基中菌丝具横隔多核?#31181;?#29978;繁且不规律细胞?#36164;?#21547;颗粒老后含空泡及油滴菌丝体不产生与营养菌丝有区别的分生孢子梗根生孢子着生在菌丝及其?#31181;?#30340;顶端单生或以向基式生出26个成链闭囊壳球形有柄柄长短不一你囊壳内散生十多个子囊子囊球形含8个子囊孢子成熟后子囊壁解体孢子剩留在薄壁的闭囊壳内见图26

 

红曲菌属的一些菌株可产生桔青霉素

各种真菌的产毒培养方法

将待产毒菌种转种活化后分别接种于?#23460;?#30340;产毒培养基中如麦芽汁-酵母膏麦芽汁-蛋白胨及马铃薯-酵母膏-蔗糖和或其它?#23460;?#30340;产毒培养基置281培养14 d或更长时间后进行真菌毒素的提取及检测

各种真菌毒素的检测方法

各种真菌毒素的检测方法可参考下述标准或其它相关方法

7.1 黄曲霉毒素  参考GB 5009.24GB/T 18979GB 5413.37

7.2 脱氧雪腐镰?#27602;?#28911;醇 参考GB/T 23503

7.3 青霉素 参考GB/T 5009.185

7.4 禇曲霉毒素A 参考GB/T 23502

7.5 玉米赤霉烯酮 参考GB/T 5009.29

7.6 桔青霉素 参考GB/T 5009.222-2008

7.7 伏马毒素 参考GB/T 25228-2010

7.8 T-2毒素 参考GB/T 23501-2009

7.9 HT-2毒素 参考SN/T 3136-2012

7.10 3-硝基丙酸 参考固相萃取-超高效液相色?#29366;?#32852;质谱法检测甘蔗中3-硝基丙酸的方法研究.[J]中国食品卫生杂志,2012年第2期或甘蔗及甘蔗汁中3-硝基丙酸的薄层色谱测定法.[J]卫生研究,198805

 

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