微生物技術資料
文章檢索
  首頁 > 微生物知識->海博原創文章->標準菌株驗證鑒定步驟

標準菌株驗證鑒定步驟

青島海博生物
錄入時間:2016-8-16 10:28:43 來源:青島海博生物

1、菌種活化:干粉標準菌株           標準貯備菌株           工作菌株;

1.1金黃色葡萄球菌、大腸埃希氏菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌標準菌株:挑取部分干粉溶解于0.9%無菌氯化鈉溶液中,劃線接種于營養瓊脂平板上,36℃±1℃培養18-24小時。并觀察菌落形態。

a.金黃色葡萄球菌:菌落凸起,圓形,不透明;b.大腸埃希氏菌:菌落稍凸,圓形,濕潤,乳白色;c.銅綠假單胞菌:菌落扁平,圓形,邊緣不整齊,光滑濕潤,可產生藍綠或黃綠色素;d. 枯草芽孢桿菌:表面粗糙不透明,鏡檢菌體有芽孢。

1.2白色念珠菌:挑取部分干粉溶解于0.9%無菌氯化鈉溶液中,劃線接種于改良馬丁瓊脂培養基平板或PDA瓊脂平板上,30℃-35℃培養24-48小時。本菌細胞呈卵圓形,很象酵母菌,比葡萄球菌大5~6倍,革蘭氏染色陽性,但著色不均勻。

黑曲霉:挑取部分干粉溶解于0.9%無菌氯化鈉溶液中,劃線接種于改良馬丁瓊脂斜面培養基上,23℃-28℃培養48-96小時。菌叢呈黑褐色,粗糙。

1.3生孢梭菌:挑取部分干粉溶解于0.9%無菌氯化鈉溶液中,接種于硫乙醇酸鹽流體培養基中,30℃~35℃培養18-24小時;或在厭氧條件下接種于哥倫比亞瓊脂上,30℃~35℃厭氧培養18-24小時。

2、菌種鑒定:

2.1金黃色葡萄球菌:

   革蘭氏染色試驗:革蘭氏陽性菌(紫色),葡萄狀排列,球菌。

   兔血漿試驗:接種1個單菌落于1支兔血漿溶液中,30℃-35℃培養至6小時,每半小時觀察一次。凝固為陽性。金黃色葡萄球菌為陽性反應。

2.2大腸埃希氏菌:

  革蘭氏染色試驗:革蘭氏陰性桿菌,紅色。

  IMVC生化試驗:

2.3銅綠假單胞菌:

革蘭氏染色試驗:革蘭氏陰性桿菌,紅色。

氧化酶試驗:將氧化酶試紙用蒸餾水浸濕,用細玻璃棒或一次性接種針挑取單個菌落,涂在試紙上。在60s內變為藍色或藍紫色為陽性,不變色為陰性。

綠膿菌素試驗:取斜面培養物接種于PDP瓊脂培養基斜面上,培養24小時,加三氯甲烷3~5ml至培養管中,攪碎培養基并充分振搖。靜置片刻,將三氯甲烷相移至另一試管中,加入1mol/L鹽酸試液約1ml,振搖后,靜置片刻,觀察。若鹽酸溶液呈粉紅色,為綠膿菌素試驗陽性,否則為陰性。本菌為綠膿菌素試驗陽性。

熒光試驗:接種于金氏B培養基(或假單胞菌產熒光色素培養基)上,36℃±1℃培養18-24小時,在366nm紫色燈下有藍綠色熒光。

2.4枯草芽孢桿菌:

菌落形態:表面粗糙不透明,有皺摺。

鏡檢:用芽孢染色液染色,菌體有芽孢。

2.5白色念珠菌:

革蘭氏染色試驗:呈卵圓形,很象酵母菌,比葡萄球菌大5~6倍,革蘭氏染色陽性,但著色不均勻。

念球菌顯色培養基:30-35℃培養24-48小時,呈綠色菌落。

產芽管試驗:挑取1%吐溫80-玉米瓊脂培養基上的培養物,接種于加有一滴血清的載玻片上,蓋上蓋玻片,置濕潤的平皿內,置35~37℃、1~3小時,置顯微鏡下觀察,可見到由孢子長出短小芽管。

2.6黑曲霉:23℃-28℃培養48-96小時。菌叢呈黑褐色,粗糙,有黑色孢子產生。

2.7生孢梭菌:

革蘭氏染色試驗:革蘭陽性梭菌,有或無卵圓形或球形的芽孢。

哥倫比亞瓊脂培養基試驗:接種于含慶大霉素的哥倫比亞瓊脂培養基平板上,置厭氧條件下培養48~72小時,應生長。

過氧化氫酶試驗:滴加3%過氧化氫試液,若菌落表面有氣泡產生,為過氧化氫酶試驗陽性,否則為陰性。本菌為陰性反應。

3、需購買試劑:




 

上一篇:熒光實驗結果觀察

下一篇:沒有了!

相關文章:
醫院消毒衛生標準 生活飲用水標準檢驗方法(微生物指標)所需培養基
抑菌劑效力檢查法(不同標準) 食品安全國家標準 食品微生物檢驗 總則 征求意見稿
化妝品中微生物的控制指標和檢測標準 標準菌株驗證鑒定步驟
潔凈室潔凈度的等級標準 純化水及注射用水標準(2015版藥典)
標準/質控菌株概述 我國的標準、標準分類以及標準化
首頁 | 關于我們 | 網上商城 | 加入收藏 | 在線客服 | 網站地圖| 聯系我們
地址:青島市李滄區龍水路318號D座
電話:400-0532-596 0532-66087773
66087762、81935169

傳真:0532-81935080 66087775

郵箱:[email protected]

QQ:4000532596

投訴與建議
電話:13105190021 13006536294
郵箱:[email protected]
©2001- 版權所有 青島高科技工業園海博生物技術有限公司 魯ICP備05018323號
火影忍者剧场版1
内蒙古时时历史结果查询 3分赛查询 七乐彩复式玩法 四川时时号码 秒速飞艇全部开奖记录 pk10开彩结果 乐彩彩票破解 云南时时走势规律 安徽时时开奖结果走势图 五分赛车能靠谱吗