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亚硒酸盐增菌培养基的原理及使用注意事项

许英俊
录入时间:2018-3-20 14:51:39 来源青岛海博生物

试验原理

本培养基主要用于增殖标本中的沙门氏菌其中胰蛋白胨提供碳源和氮源满足细菌生长的需求乳糖是可发酵的糖类亚硒酸氢钠对革兰氏阴性杆菌具有毒性?#31181;?#19981;发酵乳糖的革兰氏阳性菌和非沙门氏菌的大多数革兰氏阴性肠道菌但大肠杆菌等细菌能使乳糖发酵产酸进而中和因亚硒酸盐被细菌还原而产生的碱磷酸盐是缓冲剂保持培养基PH稳定有利肠道致病菌的生长繁殖

试验结果判断

质控菌株接种后于361培养18-24h结果如下  

 菌 名

 菌 号

 生长状况

 培养特征

 鼠伤寒沙门氏菌

 ATCC14028

 良好

 变红混浊

 大肠埃希氏菌

 ATCC25922

 受?#31181;?/span>

 澄清或微混浊

粪肠球菌

 ATCC29212

受?#31181;?/span>

澄清或微混浊

 

 

不同菌种在亚硒酸盐增菌液中培养的结果

使用方法

1按说明书称取适量干粉加热溶解于1000ml蒸馏水中分装无菌试管或三角瓶备用注无需高压灭菌

2污水取200ml污水用灭菌滤膜进行抽滤用100ml二倍浓度SF增菌液把滤膜上截留的杂质洗脱到灭菌三角瓶内充分摇?#21462;?/span>

污泥用灭菌匙取污泥20g放入灭菌容器内加入200ml灭菌水充分混匀制成110混悬?#28023;?#25671;?#21462;?#21152;100ml?#30967;?#26377;100ml二倍浓度SF增菌液的已灭菌的三角瓶内摇?#21462;?/span>

3将已接种的三角瓶放入恒温培养箱中361培养1824h

四注意事项

1亚硒酸盐具有致畸毒性使用时应特别注意

2此培养基不得高压灭菌也不得用较长时间的流通蒸汽灭菌或较长时间的煮沸灭菌制成的培养基应贮存于4冰箱

3此培养基中的蛋白胨品种很重要因?#23435;?#35770;国产或国外蛋白胨在使用前必须先作细菌学检测国产蛋白胨必须做到每批检测

4Oxiod?#26893;?#36824;介绍用?#20107;?#37255;代替乳糖用于分离伤寒沙门氏菌及乙型副伤寒沙门氏菌Hobbs等比较含乳糖和含?#20107;剂?#32452;亚硒酸盐增菌培养基在38份伤寒阳性粪便中由含?#20107;?#37255;组分离出32例阳性而含乳糖组只有5例阳性显示?#20107;?#37255;对分离伤寒沙门氏菌有高度选择性

5粪便标本接种量约占培养基体积的1%或将含有粪便的棉拭子插入培养基中尿液标本可等量加入双倍浓度增菌液中增菌时间应根据标本污染情况而定污染严重的增菌在18小时以内反之可?#23454;?#24310;长增菌时间但不得超过24h即转种于选择性分离培养基因延长增菌时间可使大肠菌群?#26438;?#29983;长繁?#24120;?#24433;响沙门氏菌检出

 

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